STEEM на русском на steeme.ru
Горячее
Лучшее
Новое
 
STEEME.RU :: Записи с тэгом "ru-cancer"
$0.118

На шаг ближе к диагностике рака на ранней стадии


Учёные из Университета Юты (University of Utah) нашли способ повысить чувствительность жидкой биопсии — новой методики выявления опухолевых клеток и их ДНК в крови пациента. Результаты исследования опубликованы в журнале PLOS Genetics,

Жидкая биопсия — неофициальное название анализа крови для диагностики рака. Он требует минимального вмешательства и мог бы заменить традиционную биопсию — болезненную и рискованную процедуру, в ходе которой врач вводит иглу в тело пациента и берёт образец тканей. Однако на данный момент этот анализ недостаточно чувствителен, особенно при обнаружении солидных опухолей, которые ещё не дали метастазов.

Цель жидкой биопсии — поиск опухолевой ДНК в пробе крови. К сожалению, распознать так называемые циркулирующие опухолевые ДНК (цоДНК) среди множества ДНК здоровых клеток так же сложно, как искать иголку в стоге сена. Новое исследование показало, что фрагменты опухолевых и здоровых ДНК отличаются по размеру — и это открытие позволит лучше их различать.

Изучая животную модель глиобластомы — агрессивной опухоли мозга — исследователи заметили, что цоДНК короче здоровой ДНК на 20—50 пар азотистых оснований. В ходе экспериментов на животных, больных раком лёгких, они убедились, что эти наблюдения верны не только для одного вида опухоли. Однако было неясно, сохраняются ли эти различия у людей.

Исследователи взяли кровь у здоровых добровольцев и пациентов с меланомой и сравнили их ДНК. Оказалось, что средняя длина циркулирующих ДНК раковых больных на 20—50 нуклеотидов меньше. При этом фрагменты ДНК, содержащие мутировавшие гены — опухолевые маркеры — короче здоровых генов того же человека. В ходе другого эксперимента учёные сделали анализ ДНК четырёх человек, больных раком лёгких. Когда они выделили короткие фрагменты ДНК, соотношение цоДНК по отношению к здоровым выросло в 2,5—9 раз. Этот подход оказался особенно эффективным при анализе образцов крови, в которых опухолевая ДНК не была ярко выражена.

«От чувствительности этого теста зависит, сможем ли мы диагностировать рак или нет», — говорит Хантер Андерхилл (Hunter Underhill), один из авторов исследования. «Возможно, благодаря этой разработке мы научимся обнаруживать очень низкие количества циркулирующей опухолевой ДНК и таким образом, диагностировать солидные опухоли на ранней стадии с помощью простого забора крови», — добавляет он.

Циркулирующие опухолевые ДНК (цоДНК) — фрагменты ДНК погибших опухолевых клеток, попавшие в системный кровоток. Большинство фрагментов цоДНК состоят из 180—200 пар оснований. Свободно циркулирующие фрагменты опухолевой ДНК позволяют получить более полную информацию о генетических свойствах опухоли, их можно оценить количественно (для определения истинного объёма опухолевой массы, её динамики в процессе лечения), и качественно. ЦоДНК позволяют увидеть общую картину и понять, как раковые клетки распространяются в организме, в то время как биопсия предоставляет информацию лишь о локальной опухоли.
Фрагменты свободно циркулирующей ДНК впервые были обнаружены в 1948 г. и до недавнего времени использовались для диагностики генетически обусловленных заболеваний плода. Именно эти исследования положили начало разработке и клиническому применению инструментов поиска циркулирующей в крови ДНК, качественно отличающейся от соматической ДНК организма-хозяина.

Сóлидными (англ. solid — твёрдый) называют негемопоэтические опухоли, то есть опухоли, развившиеся не из клеток кроветворной системы. Солидные опухоли могут быть доброкачественными и злокачественными, но чаще, говоря о них, подразумевают именно злокачественные опухоли.

Источник информации: http://22century.ru/med-n-health/29429 

  

Пост в рамках общественного проекта "Технологии долголетия" - другие записи читайте на SteemIt по тэгу #ru-longtech

Цель проекта: популяризация идеи о возможном достижении физиологического бессмертия научными методами в обозримом будущем. Если вы согласны, что быть здоровым лучше, чем стареть и умирать, поддержите посты #ru-longtech вашими голосами (теперь ведь учитываются голоса в течении месяца).

$0.003

Большая грудь — уже не модно


В 2013 году мир изумила новость о том, что американская актриса Анджелина Джоли удалила грудь из-за высокого риска онкологии. А в 2015 году — еще и яичники. Общественность посчитала, что это блажь богатой дамы, однако доктора встали на сторону актрисы. У Джоли обнаружили наследственную мутацию гена BRCA1, которая приводит к агрессивной онкологии. По оценкам врачей, риск заболеть у Анджелины составлял 86 процентов. Ликвидация «неблагонадежных» органов снизила его до пяти. Хирургическая профилактика считается сегодня едва ли не самой эффективной в онкологии. Она используется во многих странах, но в России законодательно запрещена. Врачи предлагают пациентам из групп риска оперироваться в других странах, ведь в ряде случаев даже регулярные обследования не помогут предотвратить болезнь. «Лента.ру» вместе с врачами и женщинами из группы риска попыталась разобраться в необходимости и перспективах радикальной профилактики рака.

Не положено

У 37-летней Марины Неймушиной (фамилия изменена) несколько лет назад от рака груди умерла 53-летняя мать, чуть позже — тетя. Недавно онкологию диагностировали и у 30-летней родной сестры.

— Я на всякий случай тоже пошла к онкологу, — рассказывает Марина. — Обычный осмотр и маммография показали, что проблем у меня нет. Но я просила совета по генетическому анализу — все же такая плохая наследственность. Врач плечами пожал: «А зачем вам зря переживать? Многие знания — многие печали». Тогда я просто пошла наугад в одну из популярных в столице лабораторий. Там сразу поняли, о чем речь, и взяли кровь на самые популярные мутации.

Результат теста показал, что риск возникновения опухоли в груди у Марины точно такой же, как и у Анджелины Джоли, — около 90 процентов.

— Глядя на то, как сейчас мучается сестра и сколько ей требуется денег на нормальное лечение, я решила, что лучше все себе заранее отрезать, — говорит Марина. — Пришла к врачу, которого мне порекомендовали. Тот сразу скуксился: «Да, опасность есть. Но в России превентивную мастэктомию (удаление молочной железы) здоровым женщинам не делают. Можно неофициально в клинике пластической хирургии. Но гарантии, что операция пройдет хорошо, никто не даст. У пластических хирургов нет соответствующего опыта, могут оставить "лишнюю" ткань». Есть еще вариант поехать за границу. Но это опять же стоит денег. Можно жить тут и трястись по поводу каждого прыщика.

По словам заведующего отделением опухолей молочной железы ФГБУ «НИИ онкологии им. Н.Н. Петрова» Петра Криворотько, мутация генов BRCA1 и BRCA2, вызывающая рак груди, в популяции всех женщин в России составляет 5-6 процентов. Это само по себе не значит, что все они станут пациентками онкологических клиник, но вероятность того, что это случится, у них в 8-9 раз выше, чем у остальных.

— Случай Анджелины Джоли отличается от нашей действительности, — объясняет Криворотько. — Она жительница другой страны со своими стандартами лечения. У нас мутация генов у здоровых женщин не является показанием для профилактической мастоэктомии. До сих пор у врачей нет единого мнения о том, чего тут больше — пользы или вреда. Потому что тогда нужно говорить об удалении не только груди, но и яичников. «Поломанные» гены представляют повышенный риск и для них. Технически операции простые, но психологически это тяжело и непросто для пациентки. Эти органы являются атрибутами женщины.

Сам Петр Криворотько считает, что дамам, у которых опухолей не обнаружено, лучше составить с грамотным онкологом план наблюдения и тщательно ему следовать. Но если раковая опухоль уже поразила одну грудь, и при этом анализ показал генетическую мутацию, здоровую безопаснее будет удалить. Однако сделать это достаточно трудно. Многие больницы не берутся делать это даже на коммерческой основе.

По словам директора фонда профилактики рака «Живу не напрасно» онколога Ильи Фоминцева, врачи просто боятся. Все медицинские процедуры в России регламентируются законом «Об охране здоровья граждан». В статье 37 там сказано о стандартах и порядке оказания медпомощи, которые обязательны для исполнения как частными, так и государственными медучреждениями. Мастоэктомия в списке госуслуг есть, однако показания к ней определяются медико-экономическими стандартами. Для профилактики при онкогенных мутациях их просто не существует.

— А если нет — значит, легально ее сделать нельзя, — продолжает Фоминцев. — Иногда врач, если понимает, что риски у пациентки огромные, на свой страх и риск пишет другие показания для ампутации, притянутые за уши. Например, гангрена или что еще. Берет информированное согласие у пациентки, что о последствиях она предупреждена. Но при этом врач понимает, что если больная пойдет в суд, то иск она наверняка выиграет.

Легально превентивная мастоэктомия проводится только в федеральных научных центрах в рамках каких-то апробаций. Однако в фонде профилактики рака утверждают, что им не известно, чтобы на эту тему проводилось какое-то исследование. Следовательно, сейчас превентивное удаление органов невозможно. Эксперты считают, что это проблема: у пациентов отнимают право выбора. Да и по финансовым соображениям гораздо дешевле предотвратить, чем потом тратить сотни тысяч на лечение.

— Возможно, хирургия — топорная профилактика, — грустно разводит руками Фоминцев. — Однако другого пока не придумали. Наука не стоит на месте. Вероятно, со временем появятся другие методы предотвращения болезни, кроме хирургического. Но пока, в случае генетических раков, это наиболее эффективно. В других странах это поняли и используют. В России же для этого нет нормативной базы.

Как говорят юристы, чтобы «метод Джоли» легализовался в России, нужно провести его клиническую апробацию и получить одобрение Минздрава. Обойти эту процедуру нельзя, даже если за рубежом методика давно и активно используется.

— Питерский НИИ онкологии готов подать заявку в свой этический комитет, — продолжает Фоминцев. — Но для двух-трехгодичного исследования о стандартах превентивной хирургии требуется примерно 30 миллионов рублей. Государство уже давно не выделяет средств на подобные научные разработки, так что необходимо искать альтернативные источники финансирования.

Что вам отрезать?

Если на питерское исследование средства удастся найти, касаться оно будет исключительно мастоэктомии. Однако на Западе для профилактики «наследственного» рака могут ампутировать желудок, щитовидку или прямую кишку. В США этот метод актуален, но даже там врачи и пациенты вынуждены делать непростой выбор.

Директор отделения хирургической онкологии Mercy Medical Center в Балтиморе (США) Вадим Гущин:

Профилактическая ампутация — очень узкое направление в онкологии. Известно больше ста мутаций генов, и ученые постоянно открывают новые. Уследить за этим трудно. Тестировать на все мутации обычного человека — безумие. Возможны и ложноположительные результаты. А еще надо понимать, что большинство всех видов рака — порядка 90 процентов — идут без мутаций, без всяких генетически рисков, то есть спрогнозировать их практически невозможно.

Сейчас мы умеем определять около десятка раков, связанных с «поломкой» генов. Исследование начинается с того, что врач собирает историю болезни пациента, спрашивает о его семье. Если, например, дед у человека болел раком желудка и умер в 30 лет — это неспецифично, очень рано для этого вида рака. Онколог сразу должен насторожиться и направить клиента на генетическую консультацию. Генетик определяет, на какой синдром похож тот или иной случай, и предлагает найти мутацию. Сейчас есть наборы тестов. Даже если ты точно не знаешь, на какую «поломку» стоит проверяться, то набором тестов можно охватить большое количество. Потом смотрят, чем грозит найденная мутация. Если по расчетам доктора у восьми из десяти человек она приводит к раку желудка, человека информируют.

В Америке превентивные меры входят в рекомендации лечения — то есть врач обязан проинформировать пациента о рисках возникновения онкологии. И человек выбирает, что для него предпочтительнее. Удалить непораженный орган технически просто, но пациент должен знать, с чем он столкнется, если решится на операцию, и что его ждет, если он этого не сделает. Когда у кого-то находят мутацию, каждый раз врачу предстоит большая работа с пациентом. Недавно я проводил гастрэктомию — удаление желудка. У пациентки была найдена мутация гена CDH1, вызывающая у 80 процентов людей агрессивный рак желудка. Мать женщины умерла от этого вида опухоли, и мы с ней мучительно рассматривали все перспективы на будущее. Причем мнение больного может меняться: «Подождем годика два, это терпит?» Или: «А лучше прямо сейчас прооперируем, что-то у меня там закололо».

Но каким бы ни было решение пациента — на враче тоже большая ответственность. Если ребенку в 10 лет удалить желудок, у него рост замедлится, будут и другие последствия. С фамильным полипозом кишки мы советуем удалять толстую кишку в возрасте 20 лет. А как семью заводить? Как сексом заниматься с колостомой (искусственно выведенная на переднюю брюшную стенку часть толстого кишечника), когда на дню 10-12 раз бегаешь в туалет? Это все непростые вопросы, которые нужно обсудить с пациентом.

Выбор тактики выжидания в ряде случаев также несет риски. Я знаю, что в России делают упор на концепцию ранней диагностики опухоли. Многие врачи говорят о том, что это самое важное, что может произойти в онкологии, — чем быстрее найдешь опухоль, тем лучше прогноз. Но скорее всего это не так. Например, рак желудка невозможно подловить на такой ранней стадии, когда он только-только возник, ты его соперировал и дальше все хорошо. Каждый день гастроскопию не будешь ведь делать. К тому же первая и третья стадия — это разные виды опухолей. Они просто выглядят одинаково. Возьмите «Мерседес» и «Запорожец». Обе — машины. Но один быстрее доберется из Москвы до Питера, другой затратит в три раза больше времени. Так и с раком. Если опухоль большая — это вовсе не означает, что она медленно росла с первой до третьей стадии. Это образование сразу может быть очень агрессивным и быстро увеличиться. То есть в ряде случаев даже внимательное наблюдение может не помочь вовремя прервать зародившийся процесс.

«Жить без органа — лучше, чем умереть»

Светский обозреватель Божена Рынска год назад узнала, что так же, как и Анджелина Джоли, имеет мутацию гена BRCA1:

У меня есть знакомая, которую рак настиг в 30 лет. При этом у ее тети, маминой сестры, тоже был рак, от которого она умерла. Но приятельница даже не догадывалась, что хорошо бы сделать какие-то генетические анализы, и если наследственность подтвердится — удалить грудь. Никто из врачей этого ей просто не сказал. Ее лечили то ли гормонами, то ли химией. Рак у нее прошел, но через три года вернулся в другой форме и другого вида. Она вылечила его тяжелейшей химиотерапией. Но через некоторое время он опять к ней вернулся — уже в третьем виде. Сейчас вроде бы процесс удалось снова затормозить. Но ей назначена пожизненная химия. Понятно, что так можно протянуть недолго.

Генетически обусловленный рак — страшная вещь. Ты его в дверь — он в окно. Это рак, который вцепится в человека и не отпустит, пока не добьет. Я сдала генетические анализы год назад. Пошла не сама. Хотя наследственность по онкологии у меня очень плохая — от рака умерла бабушка по маминой линии, бабушка по папиной, у папы — рак. Но тем не менее в больницу я не шла. Было не до того.

Вышло так, что я работала с компанией, которая мне предложила по бартеру сделать полное секвенирование гена. Согласилась. И тут они мне звонят и говорят, что надо перепроверить, — обнаружили странную мутацию. Потом они сказали, что у них это не подтвердилось. Но к этому моменту я уже сдала анализы в другом месте, за границей. У матери нашли ту же мутацию. Значит, «поломку» я унаследовала от нее. По материнской линии у нас у всех рак проявляется поздно. Доктора говорят, что генно-обусловленный рак, если возникает в семье в каком-то возрасте, в таком он и будет. Так что до 50 лет я могу спокойно жить и ничего себе не удалять. Позже придется это сделать. Потому что лечить генный рак — это хуже всего. Тем, у кого найдена мутация генов, нужно серьезно обо всем подумать.

В России прогрессивные врачи — за превентивное удаление. Я знаю, что многие их коллеги жмут плечами: «Зачем здоровый орган трогать?» Для генетически обусловленного рака вероятность развития составляет 86 процентов. Для того чтобы понять, заболеете вы или нет, нарежьте сто карточек. На 14 сделайте пропуск, а на остальных напишите «Рак». И посмотрите, что вытянете. Все вопросы отпадут сами собой. Мы с мужем хорошо этот вопрос вентилировали, советовались в Америке, в других странах. Если у тебя нашли генную мутацию, которая вызывает онкологию, и она в независимой лаборатории подтвердилась, шансов проскочить очень мало. Знаю, что и после удаления риски остаются. Около пяти процентов. Опять же — нарежьте карточки и посмотрите. Я для себя выбрала. Я знаю, что нужна своему супругу, нужна своей кошке. И для меня жить без какого-то органа — лучше, чем страдать или умереть. К тому же большая грудь — уже не модно. Она старит. Мастэктомия кому-то может помочь решить и косметические проблемы.

Источник информации: https://m.lenta.ru/articles/2016/07/21/method_jolie/ 

  

Пост в рамках общественного проекта "Технологии долголетия". Другие записи читайте на SteemIt по тэгу #ru-longtech

Цель проекта: популяризация идеи о возможном достижении физиологического бессмертия научными методами в обозримом будущем.

$0.001

Голый землекоп и рак: кто кого?


Ольга Волкова, «Биомолекула»

Первая половина 2016 года принесла две интересных новости о голых землекопах – как водится, плохую и хорошую. Выяснилось, что злокачественные новообразования изредка, но всё же поражают этих грызунов-долгожителей. Что, однако, не опровергает факта их феноменальной устойчивости к раку. В объяснении механизмов этой устойчивости как раз и преуспели ученые. Оказалось, что индуцированные плюрипотентные стволовые клетки землекопов, в отличие от мышиных и человеческих, не провоцируют рост опухолей. И всего из-за двух генетических особенностей. Манипуляции с парой «враждующих» генов – подавляющим и, наоборот, стимулирующим онкогенез – подвели биологов к открытию специфичного для землекопов механизма клеточного старения и к возможности преодоления главной проблемы клеточной терапии человека.

Небольшой африканский эусоциальный зверек со смешным названием голый землекоп (англ. naked mole-rat, лат. Heterocephalus glaber) прославился благодаря беспрецедентной для грызунов продолжительности жизни, невосприимчивости к раку и ряду уникальных физиологических и биохимических особенностей. О возможных причинах жизнестойкости этих подземных зверьков и их почти таких же удачливых родственников «биомолекула» подробно рассказывала [1]. До 2016 года не наблюдали ни одного случая развития злокачественных новообразований у землекопов. Но время и дотошность биологов сделали свое дело.

Онкопатология у голого землекопа: первые истории болезни

В февральском номере Veterinary Pathology появилось сообщение о двух подтвержденных случаях рака у землекопов из американских зоопарков – Брукфилдского (штат Иллинойс) и Национального (Смитсоновского) (г. Вашингтон) [2]. Опухоли разной природы обнаружили у пожилых (старше 20 лет) самцов-рабочих.

В первом случае бессимптомное подвижное 1,5-сантиметровое новообразование извлекли из подмышечной впадины. На основе цитологических, гистохимических, иммуногистохимических и ультраструктурных характеристик опухоль классифицировали как недифференцированную аденокарциному неясного происхождения – из эпителиальных клеток то ли молочных, то ли слюнных желез, хотя вариант метастаза иной опухоли тоже не исключили. Количество митозов в образцах в основном не превышало 0–1 в поле зрения (при 400-кратном увеличении) и лишь местами достигало 4. Локальную инвазию оценить не удалось, поскольку зона трансформации доходила до границ извлеченной ткани. Однако через три месяца после операции в подмышечной впадине зверька наблюдалось лишь нормальное рубцевание – никаких признаков рецидива. Оценить влияние опухоли на самочувствие и продолжительность жизни землекопа не довелось: что до, что после операции его здоровье и социальная адаптация не страдали.

А вот второй случай вряд ли можно назвать бессимптомным, хотя рак выявили уже посмертно: зверька пришлось усыпить из-за неизлечимого тяжелого дерматита и прогрессирующей потери веса. Не исключено, что обнаруженная при вскрытии желудка нейроэндокринная карцинома (устаревшее название – карциноид) могла спровоцировать подобную симптоматику. Происходит такая опухоль из энтерохромаффиноподобных_клеток, секретирующих гистамин. У усыпленного землекопа раковые клетки проникли в слизистую и подслизистую оболочки стенки желудка, местами – в мышечный слой и даже в прилегающие тонкостенные сосуды (видимо, лимфатические), однако отличались низкой митотической активностью и метастазов не сформировали.

Ранее в той же колонии землекопов Брукфилдского зоопарка уже четыре раза фиксировали гиперпластические изменения. Все находки были случайными: разрастания тканей обнаруживали при вскрытии усыпленных по иным причинам особей (эти зверьки, например, могут серьезно травмироваться в семейных стычках). В отличие от тех, судя по всему, доброкачественных образований, два новых случая неоплазии не оставили сомнений в том, что у голых землекопов может развиваться рак. Другой вопрос, что происходит это феноменально редко. И было бы странным, если бы многолетние и целенаправленные наблюдения никогда не выявили бы рака у этого вида – это же не гидры какие-нибудь, а самые настоящие млекопитающие. Нельзя исключить и особую предрасположенность конкретных колоний к неоплазии: ведь в размножении участвуют единичные особи, и вполне вероятно закрепление в популяции каких-то редких мутаций.

Авторы статьи [2] обращают внимание читателей на то, что выявленные случаи никак не опровергают факта выдающейся невосприимчивости голых землекопов к раку. Зато тщательный анализ этих случаев необходим для разработки критериев диагностики доброкачественных и злокачественных опухолей и предраковых состояний у этого вида животных, который всё чаще используют в качестве модельного биогеронтологи и онкологи. И используют, между прочим, успешно.

Полезные «настройки» землекопа: стволовые клетки с сюрпризом

Ранее группа исследователей из США показала, что к противораковой защите землекопов может иметь отношение специфичная для этого вида экстремально высокомолекулярная гиалуроновая кислота, да не просто она, а особенности «гиалуронового» сигналинга, и в частности конечного его этапа – индукции генетического локуса INK4. Этот локус кодирует у ряда животных (и человека тоже) опухолевые супрессоры p15Ink4b, Arf и p16Ink4a, а у голого землекопа еще и уникальный дополнительный продукт – гибрид p15Ink4b и p16Ink4a [1, 3], названный pALTInk4a/b. Синтез последнего индуцируется при разных стрессовых воздействиях и в процессе раннего контактного торможения клеточного деления, потому-то фибробласты землекопа в культуре осторожничают, прекращая деление при малейшем контакте с соседями и предотвращая тем самым опухолеобразование. Не удивительно, что локус INK4 (он же – CDKN2A) очень часто мутирует при раке у людей, а кроме того, участвует в развитии некоторых типов старения [1].

И вот этот локус вновь привлек внимание биологов, но уже японских. Главным фигурантом нового дела стал другой его продукт, Arf (alternate reading frame protein), вышли на который довольно неожиданным путем – при манипуляциях с индуцированными плюрипотентными стволовыми клетками (ИПСК) землекопа [4].

Как неоднократно рассказывала «биомолекула», производство таких клеток, то есть перепрограммирование соматических клеток в дедифференцированные, напоминающие эмбриональные стволовые клетки, может быть крайне полезным и для терапии множества патологий, и для исследовательских целей [5–7]. Однако такое перепрограммирование требует временной экспрессии «онкогенного коктейля» – генов Oct3/4, Sox2, Klf4 и c-Myc (OSKM), кодирующих транскрипционные факторы. Их активность сближает процесс создания ИПСК с онкогенезом: в клетках синонимично меняется экспрессия генов, эпигенетический профиль и метаболизм. Подобно эмбриональным стволовым клеткам, ИПСК, даже кратковременно экспрессирующие этот «коктейль» in vivo, могут провоцировать формирование опухолей, чаще всего тератом [8]. Причем процесс опухолевой трансформации даже не требует каких-то мутаций, достаточно изменения профиля метилирования ДНК [9]. Риск развития опухолей препятствует введению клеточной терапии в клиническую практику, потому способы снижения этого риска ищут в совершенно разных направлениях: и в модификации состава перепрограммирующих факторов, и в принуждении к гибели неспособных к полной дифференцировке ИПСК, и во внутренних резервах этих клеток [10].

Японские исследователи решили проверить, способны ли к перепрограммированию и образованию опухолей клетки животных, устойчивых к раку. Кожные фибробласты голого землекопа подошли как нельзя лучше. Оказалось, что получить ИПСК из них вполне возможно с помощью ретровирусных векторов, временно экспрессирующих мышиный OSKM-коктейль. Однако, как ни странно, эти ИПСК, в отличие от мышиных и человеческих, после пересадки в яички иммунодефицитных мышей не формировали тератом (рис. 1).

Рисунок 1. Яички иммунодефицитных мышей или их опухоли после трансплантации ИПСК разного происхождения. Сверху вниз: человека (через 10 недель), мыши (через 4 недели) и голого землекопа (через 10 и 20 недель). Рисунок из [4].

Чтобы выяснить, какие факторы отвечают за онкогенность стволовых клеток, а какие препятствуют этому у ИПСК землекопа, ученые проанализировали транскрипционный профиль клеток (используя секвенирование РНК [11] и количественную ПЦР в реальном времени). В итоге выявили две существенных особенности ИПСК землекопа.

Активный продолжительный синтез одного из продуктов локуса INK4 – Arf (он же – p19Arf у мышей и p14Arf у людей), способствующего предотвращению избыточного клеточного деления: он стабилизирует контролера клеточного цикла p53, блокируя уничтожающий его фермент Mdm2. Как известно, p53 действует через активацию синтеза p21 (этот белок участвует в дифференцировке клеток и способен ингибировать их деление даже без «приказа» p53) – и словно в подтверждение, ИПСК землекопа показали необычную активность его гена. В человеческих же и мышиных клетках синтез продуктов локуса INK4 прекращался уже на ранних стадиях перепрограммирования. Боле того, в другом исследовании было показано, что белки Arf и p16Ink4a у землекопа короче, чем у людей и мышей, и они надежно блокируют клеточный цикл фибробластов в ответ на стрессы [12].

«Молчание» гена ERas, фактора онкогенности мышиных стволовых клеток, действующего через активацию пути PI3K/AKT и принадлежащего к печально известному Ras-семейству. Как выяснилось, это молчание связано не с какими-то регуляторными моментами, а с банальной мутацией, привнесшей в ген ERas землекопа преждевременный стоп-кодон, а значит, определившей синтез неполноценного «белка-вредителя».

Интересно, что обе особенности имеют прямое отношение к сигнальным путям, выбранным в качестве возможных мишеней для продлевающей жизнь терапии [13]*.

* – В статье [13] представлена схема, где описанные сигнальные пути встречаются с известным ферментом mTOR, активная работа которого, по современным представлениям, сокращает жизнь.

Но чтобы подтвердить причастность обеих находок к потрясающей онкорезистентности ИПСК землекопа, пришлось заставить замолчать их ген Arf и компенсировать дефектный ERas рабочим, мышиным. Это привело к подавлению синтеза p21 и индукции AKT-пути соответственно [4]. Специальный тест на рост в мягком агаре и пересадка таких модифицированных ИПСК в яички мышей показали, что выключение Arf стимулирует онкогенез сильнее, чем активация ERas, а совместно эти изменения приводят к формированию крупных тератом.

С другой стороны, стабильная экспрессия трансгена Arf в мышиных ИПСК заметно защищала их от опухолевой трансформации, однако в сформировавшихся таки тератомах работа этого гена подавлялась.

Ну а самое интересное произошло, когда исследователи изучали реакцию фибробластов землекопа на выключение Arf в ходе производства ИПСК. У мышей такая манипуляция повышала эффективность перепрограммирования – подобно нокдауну последовательности Ink4a, кодирующей p16. А вот фибробласты землекопа не то что делиться и омолаживаться отказались, а приобрели все признаки сенесцентного статуса. Старение наблюдали и при отключении Arf у стрессированных фибробластов, в которых этот ген дерепрессировался в ответ на активацию онкогена c-Myc либо серийные клеточные пассажи. Дерепрессия Arf и Ink4a – нормальная реакция фибробластов многих млекопитающих на стрессы: перепрограммирование, активацию онкогенов, репликативный стресс. Стрессированные клетки стареют – и это их первая линия защиты от онкогенеза. У землекопа же, судя по всему, сформировалась дополнительная линия, срабатывающая в случае подавления синтеза Arf в стрессированных клетках (рис. 2). Этот феномен исследователи назвали старением, индуцированным супрессией Arf (ARF suppression-induced senescence, ASIS).

Рисунок 2. Перепрограммирование фибробластов голого землекопа и мыши. Особенности работы гена Arf и мутация гена ERas (обозначена перечеркиванием) «отключают» онкогенный потенциал ИПСК землекопа. Гены землекопа обозначены прописными буквами. OSKM – «генетический коктейль» для перепрограммирования (Oct4, Sox2, Klf4, c-Myc). Под старением подразумевается сенесценция клеток. mERas – мышиный, то есть полноценный, вариант гена. RIS – старение, индуцированное перепрограммированием. ASIS – старение, индуцированное супрессией Arf. Рисунок из [4], адаптирован.

Японским биологам удалось слегка проникнуть в таинство работы этого уникального механизма. Они изучили в фибробластах землекопа деятельность ряда ингибиторов клеточного цикла, обычно регулирующих старение клеток. Ранее было показано, что старение мышиных фибробластов индуцировалось гипофосфорилированием белка Rb (только фосфорилированный Rb позволяет клетке готовиться к делению) и фосфорилированием АКТ. Гипофосфорилирование Rb – ключевого, как и p53, контролера клеточной пролиферации – обычно обусловлено работой таких ингибиторов цикла, как p27, p21 и p16. Однако в фибробластах землекопа при ASIS в гипофосфорилирование Rb эти ингибиторы не были вовлечены. Фосфорилирование же АКТ происходило совместно с активацией пролиферативного ERK-пути.

Таким образом, устойчивость ИПСК голого землекопа к онкогенезу, по мнению авторов работы [4], обусловлена специфической регуляцией гена Arf и повреждением гена ERas. Дальнейшее изучение феномена ASIS поможет до конца понять причины онкорезистентности этого зверька и, вероятно, поспособствует повышению безопасности человеческих ИПСК.

Источник:  http://vechnayamolodost.ru/articles/genetika/golyy-zemlekop-i-rak-kto-kogo/

Пост в рамках общественного проекта "Технологии долголетия".
Другие записи читайте на SteemIt по тэгу #ru-longtech
Цель проекта: популяризация идеи о возможном достижении радикального продления здоровой жизни и физиологического бессмертия человека научными методами в обозримом будущем.

$0

В России люди стали чаще умирать от рака


Федеральная служба государственной статистики представила новые данные (за январь — мая 2016 года) о том, из-за чего в стране чаще всего умирают люди. В целом по России смертность стала ниже по сравнению с аналогичным периодом 2015 года — почти на 3%. Однако увеличилось количество летальных исходов, вызванных онкологическими заболеваниями. Эксперты объясняют это тем, что раньше люди не успевали заболеть раком, так как умирали раньше от других болезней, которые сейчас медицина успешно лечит.
В стране «сдают позиции» болезни органов дыхания (смертность сократилась на 14%), инфекционные и вызванные паразитами болезни (2%), туберкулез (18%). Болезни сердечно-сосудистой системы, несмотря на то, что от них умерло на 6,5% меньше людей, чем за тот же период 2015 года, продолжают оставаться основной причиной смертности. На втором месте — онкологические заболевания, количество летальных исходов в результате которых выросло в среднем на 0,3% — причем в Москве этот показатель равен уже 4%, а на Чукотке — почти 80%. Эксперты считают, что общее увеличение числа страдающих от онкологических заболеваний людей связано с «переходом» их из других категорий — к примеру, если раньше человек не успевал заболеть раком, скончавшись в 60 лет от инсульта, то сейчас он доживает до 80 лет и страдает уже от злокачественной опухоли. Председатель комиссии Общественной палаты по охране здоровья, физической культуре и популяризации здорового образа жизни Владимир Нероев согласен с этим мнением, указывая, что новые высокотехнологичные методы терапии при инфарктах и инсультах привели к снижению смертности от этих острых состояний и, как следствие, — к увеличению числа онкобольных.

В МНИИОИ имени Герцена заявили: «Рост общей смертности от онкологических заболеваний тщательно анализировался экспертами. Принципиально важно, что одновременно с ростом общего показателя изменяются два принципиально важных индикатора: пятилетняя выживаемость и летальность, которые в наибольшей степени отражают качество оказываемой онкологической помощи. Так, с 2011 года доля умерших от контингента онкобольных снизилась почти на 14%, а показатель пятилетней выживаемости онкологических больных вырос более чем на 3%». С увеличением числа раковых больных выросло и количество врачей, которые специализируются в области онкологии. Их стало больше на 5,4%.

По информации, которой владеет президент Противоракового общества России Давид Заридзе, онкобольных все же становится меньше, особенно среди мужчин. Это связано с тем, что самые распространенные у сильной половины человечества виды рака — желудка и легких — стали встречаться реже. Женщины чаще всего болеют раком груди, толстой кишки и заболеваниями половой системы (рак яичников, шейки матки), и если от онкологических заболеваний толстой кишки и молочной железы смертность снижается в результате успешной терапии, то о раке шейки матки такого сказать нельзя. «Люди, которые занимаются диспансеризацией, говорят, что на ранней стадии выявляют рак шейки матки. Но это не так, в действительности этого не происходит», — прокомментировал Давид Заридзе.

Источник информации:  http://medportal.ru/mednovosti/news/2016/07/18/217cancer/

  

Пост в рамках общественного проекта "Технологии долголетия" - другие записи читайте на SteemIt по тэгу #ru-longtech

Цель проекта: популяризация идеи о возможном достижении физиологического бессмертия научными методами в обозримом будущем. Если вы согласны, что быть здоровым лучше, чем стареть и умирать, поддержите посты #ru-longtech вашими голосами (теперь учитываются голоса в течении месяца).

$0

Причины рака: Наследственность, иммунитет, а лишь потом инфекция

Ученые активно говорят о том, что рак может оказаться заразным. Раковые клетки инфекционного типа быстро распространяются между морскими животными разных видов. Об этом сообщают исследователи из Медицинского центра Колумбийского университета (США), опубликовавшие основные выводы своих исследований в журнале Nature.

На данный момент ученые уверены, что инфекционный рак активно распространяется среди трех видов моллюсков, проживающих у берегов Канады и Испании. Группа ученых заметила у них развитие опухоли, которая изначально появилась в организме других особей. О том, может ли рак оказаться заразным для человека, Pravda.Ru поговорила с членом комитета по социальной политике Госдумы РФ и заслуженным врачом России Владимиром Круглым.

"Сейчас вирусная теория рака является преобладающей в медицине, и это предполагает некую заразность. То есть, действительно, достаточно давно уже такие данные есть, что определенные вирусы вызывают раковые опухоли. Например, вирус Эпштейна-Барр и т.д. Но речь не идет о какой-то высокой заразности этих вирусов. Но изначально рак - это дефект иммунной системы человека. То есть, для того чтобы возникла опухоль, нужно, с одной стороны, источник инфекции, а с другой стороны - наличие некой поломки в иммунной системе человека. Только тогда возникает опухоль", — объяснил в интервью Правде.Ру Владимир Круглый.

Владимир Круглый также подчеркнул в интервью Правде.Ру:"Я не думаю, что раковая опухоль столь заразна, как, например, инфекционное заболевание или кишечная инфекция". Эксперт Pravda.Ru

сказал, что если бы раковое заболевание имело такие свойства, то человечество столкнулось бы с обширными эпидемиями. "Но то, что некое инфекционное начало вызывает раковую опухоль, - это, действительно, так. Это уже давно известно, и ничего нового в том, что вы сказали, нет, на самом деле", — сказал Правде.Ру Владимир Круглый.

На вопрос Правды.Ру о том, какие меры профилактики от инфекционного типа рака существуют на данный момент, эксперт ответил: "Здоровый образ жизни. Можно в какой-то степени предотвратить усиление, укрепление иммунного ответа. Хотя, конечно, это все не должно восприниматься так упрощенно. Дело в том, что иммунная система очень сложна, и есть там и наследственные факторы, и влияние изначально генного строения человека".

Эксперт Pravda.Ru подчеркнул тот факт, что большую роль в данном вопросе играет наследственная предрасположенность, однако базой является человеческий иммунитет. На данный момент существуют исследования, помогающие изучить генетическую структуру любого человека для проведения профилактических процедур.

Владимир Круглый также сообщил Правде.Ру, что на данный момент в России ведется работа по поиску более эффективных способов лечения рака: "Сейчас очень много препаратов, таргетных лекарств для лечения онкологических заболеваний. Они изобретаются именно в России. И российские ученые при государственной поддержке, при поддержке фонда Сколково, где очень высокий уровень научных исследований, при поддержке минпромторга разрабатывают в России новые препараты".

Читайте больше на http://www.pravda.ru/news/expert/23-06-2016/1304631-kruglyj-0/

Пост в рамках общественного проекта "Технологии долголетия".
Другие записи читайте на SteemIt по тэгу #ru-longtech
Цель проекта: популяризация идеи о возможном достижении радикального продления здоровой жизни и физиологического бессмертия человека научными методами в обозримом будущем.
 

RU тэги:

ru (2853)
money (579)
steemit (573)
life (546)
sport (405)
sportus (375)
sportusbet (370)
bitcoin (342)
steem (321)
news (320)
blockchain (277)
photography (275)
art (202)
travel (177)
ru-steemit (167)
story (137)
russia (134)
writing (123)
introduceyourself (118)
food (117)
ru-steem (112)
funny (98)
rusteemitblog (94)
ru-news (93)
ru-bitcoin (92)
ru-health (86)
sports (82)
ru-longtech (82)
humor (82)
russian (81)
investments (79)
new (77)
blog (75)
recipes (75)
spreadthepower (74)
ethereum (72)
photo (72)
cryptocurrency (71)
poetry (57)
video (56)
ru-life (56)
psychology (55)
crypto (54)
ru-immortality (54)
hyip (51)
philosophy (51)
rus (50)
nature (50)
anarchism (50)
crypto-news (48)
millionaire (47)
business (47)
stemmit (46)
mining (46)
steemwatch (46)
mountshow (44)
handmade (41)
health (41)
longtech (41)
ru-cryptocurrency (40)
ru-help (40)
golos (36)
history (35)
ru-longevity (35)
hot (34)
usa (30)
top (30)
technology (30)
steemmag (29)
spam (28)
immortality (28)
ukraine (26)
longetech (26)
ru-ethereum (25)
music (25)
help (25)
beauty (25)
kitchen (25)
ua (23)
ru-writing (23)
dream (23)
post (22)
investment (22)
cyberfund (22)
love (22)
game (22)
pictures (21)
people (21)
steemkino (21)
science (21)
ru-money (20)
ru-blockchain (20)
ru-mining (19)
security (19)
ru-science (19)
eth (18)
steemsquad (18)
fun (18)
pokemon (18)
dao (18)
btc (18)
steem-help (18)
minnowsunite (17)
experiment (17)
ru-reading (17)
trading (17)
fish (17)
steemit-ru (17)
ico (17)
games (16)
football (16)
poem (16)
ru-invest (16)
motivation (16)
see (15)
politics (15)
internet (15)
world (15)
steemit-news (15)
foto (15)
wings (15)
live (14)
children (14)
lifehack (13)
lisk (13)
facebook (13)
work (13)
secret-writer (13)
coin (13)
ru-travel (13)
animals (12)
investing (12)
religion (12)
illustration (12)
painting (12)
wisdom (12)
ru-business (12)
social (12)
ru-community (12)
kibo (12)
ru-funny (11)
ru-medicine (11)
ru-introduceyourself (11)
space (11)
wolf (11)
interesting (11)
trade (11)
bussinesman (11)
news-ru (11)
youtube (11)
putin (11)
country (10)
turkey (10)
creative (10)
ru-crypto (10)
motivational (10)
education (10)
night (10)
book (10)
war (10)
economics (10)
future (10)
vote (10)
pokemongo (10)
movie (10)
ussr (10)
active (10)
skyway (10)
ru-philosophy (9)
basicincome (9)
recipe (9)
lake (9)
mushrooms (9)
hello (9)
ru-quotes (9)
en (9)
verse (9)
law (9)
bitshares (9)
gold (9)
meditation (9)
fiction (9)
photos (9)
pamplona (9)
qwe (8)
literature (8)
cat (8)
etc (8)
apple (8)
poloniex (8)
pritchi (8)
finance (8)
poems (8)
steemit-help (8)
zarubezhom (8)
ru-story (8)
ru-btc (8)
telegram (8)
christianprogress (8)
marijuana (8)
auto (8)
kz (8)
economy (8)
freedom (8)
cartoon (7)
tech (7)
trends (7)
design (7)
baikal (7)
books (7)
sevenskills (7)
family (7)
creation (7)
tourism (7)
media (7)
ru-psychology (7)
popular (7)
sailing (7)
mind (7)
censorship (7)
gardening (7)
toys (7)
bot (7)
bookmakerhell (7)
bitfinex (7)
steemitphotochallenge (7)
test (7)
cats (7)
flowers (7)
taunigma (7)
yetaras (7)
ru-future (7)
self-development (7)
iconomi (7)
postcoin (7)
productivity (7)
scam (7)
indulgence (7)
craftbeer (7)
comedy (7)
inspiration (6)
car (6)
innovation (6)
girls (6)
the (6)
mlm (6)
faucet (6)
china (6)
invest (6)
upvote (6)
steemit-faq (6)
gif (6)
newlife (6)
steemart (6)
sci-fi (6)
death (6)
autumn (6)
gaming (6)
lisk-russia (6)
bulgaria (6)
picture (6)
universe (6)
language (6)
invention (6)
army (6)
ru-trading (6)
bitcoin-ru (6)
ru-humor (6)
litecoin (6)
tisenkovv (6)
reputation (6)
anarchy (6)
craigrant (6)
ru-faq (5)
ru-video (5)
community (5)
of (5)
garden (5)
politic (5)
cinema (5)
ponzi (5)
ether (5)
wallet (5)
hobby (5)
bitcoinsider (5)
ice (5)
howto (5)
mystic (5)
ru-post (5)
ru-russia (5)
cn (5)
ru--sismgkzki (5)
corruption (5)
baking (5)
from-lj (5)
ru-food (5)
sea (5)
belarus (5)
copywriting (5)
in (5)
ru-thinking (5)
steempower (5)
sonyankastyle (5)
tips (5)
akchmen (5)
by (5)
thoughts (5)
success (5)
salad (5)
moscow (5)
ru-cancer (5)
help-ru (5)
exchange (5)
steeme (5)
miner (5)
soccer (5)
inout (5)
analytics (5)
introduce (5)
journey (5)
time (5)
microsoft (5)
brain (5)
good (5)
overview (4)
mistermax (4)
nootrobox (4)
fintech (4)
woodcarving (4)
startup (4)
suka (4)
bread (4)
misskaty (4)
ru-kino (4)
sun (4)
library (4)
cosmos (4)
ru-wisdom (4)
ru-blokcheyna (4)
english (4)
tutorials (4)
android (4)
release (4)
maltsev (4)
introducing (4)
ruonly (4)
present (4)
ru-fasting (4)
classic (4)
survival (4)
human (4)
medicine (4)
lottery (4)
cars (4)
trading-analysis (4)
profit (4)
translate (4)
positive (4)
meme (4)
you (4)
power (4)
gambling (4)
steem-fun (4)
newcryptocurrency (4)
newcoin (4)
bank (4)
fairytale (4)
memory (4)
school (4)
culture (4)
astro (4)
idea (4)
fulfillment (4)
wish (4)
bigotry (4)
app (4)
ru-steeme (4)
http (4)
justice (4)
waves (4)
steemhelp (4)
cloudmining (4)
etherium (4)
windows (4)
languages (4)
cancer (4)
text (4)
film (4)
introducemyself (4)
drugs (4)
ru-macrophilosophy (4)
networking (4)
tutorial (4)
free (4)
energy (4)
zamok (4)
ru-longetech (4)
fairy-tale (3)
faq (3)
socialnetwork (3)
recreation (3)
smile (3)
flower (3)
sex (3)
raw (3)
melnikov (3)
weapon (3)
montenegro (3)
ru-blog (3)
relax (3)
account (3)
dveri (3)
lifestyle (3)
witness (3)
spain (3)
cryptonews (3)
biography (3)
smartcontract (3)
pie (3)
translation (3)
stereotypes (3)
man (3)
pushkin (3)
google (3)
dance (3)
forest (3)
coinfox (3)
hacker (3)
ru-fishing (3)
eeoneguy (3)
earning (3)
syria (3)
governance (3)
ru-poetry (3)
cash (3)
decentralization (3)
what (3)
reading (3)
me (3)
rippel (3)
personaldevelopment (3)
absurd (3)
ufo (3)
dicov (3)
from (3)
newbee (3)
buy (3)
meat (3)
nvidia (3)
stickers (3)
state (3)
ru-politics (3)
mirra (3)
kiev (3)
greece (3)
macroquiz (3)
nasa (3)
cooking (3)
sleep (3)
poker (3)
government (3)
job (3)
fashion (3)
donate (3)
thinking (3)
guitarist (3)
mine (3)
blondgirl-way (3)
article (3)
ru--titmgkzki (3)
ru-motivation (3)
mathematics (3)
dating (3)
ned (3)
question (3)
memes (3)
stats (3)
node (3)
blogging (3)
buisness (3)
ru--potryasayusche (3)
shopping (3)
leisure (3)
china-philosophy (3)
house (3)
yoga (3)
collection (3)
vopros (3)
longevity (3)
shop (3)
steem-tutorials (3)
soup (3)
liver (3)
ru-auto (3)
obama (3)
best (3)
steemfest (3)
not (3)
bounty (3)
word (3)
travels (3)
hardwork (3)
dog (3)
ru-people (3)
peace (3)
globalengineeringbaltia (3)
dogecoin (3)
prohodim (3)
biology (3)
tv (3)
cryptovalute (3)
drawing (3)
hentai (3)
x11 (2)
tesla (2)
italy (2)
coinbase (2)
trump (2)
color (2)
links (2)
meetup (2)
makerdao (2)
cheese (2)
hashflare (2)
motocross (2)
melania (2)
twitter (2)
safe (2)
true (2)
ukr (2)
steemtools (2)
israel (2)
mist (2)
transfer (2)
pytin (2)
spacex (2)
filmmaking (2)
blocktrades (2)
peru (2)
steem-bet (2)
comments (2)
mapala (2)
thailand (2)
ru-ethereumclassic (2)
ru-criptocurrency (2)
passwords (2)
steemitchat (2)
bali (2)
beyondbitcoin (2)
dash (2)
ru-chat (2)
password (2)
asic (2)
ecology (2)
ru-steam (2)
deposit (2)
bitcoinexchange (2)
silkroad (2)
traveling (2)
kids (2)
lg (2)
politica (2)
women (2)
flash (2)
rrr (2)
ru-new (2)
steem-fr (2)
identity (2)
fraud (2)
iron (2)
ru-eth (2)
rock (2)
sony (2)
lisk-ru (2)
updates (2)
steemdollar (2)
steemdollars (2)
medvedev (2)
lgbt (2)
ilcoin (2)
sky (2)
aboutme (2)
russiansteemit (2)
cybernomics (2)
ru-financial (2)
criptodengi (2)
ecommerce (2)
shoping (2)
guide (2)
usesteem (2)
payitforward (2)
wedding (2)
testing (2)
artist (2)
ya (2)
mother (2)
vegetables (2)
writen (2)
curation (2)
it-steemit (2)
cyrillic (2)
nintendo (2)
criptocurrency (2)
ru--vau (2)
esenin (2)
indoortv (2)
mastercard (2)
ural (2)
steemit-guide (2)
smoothies (2)
one (2)
vmf (2)
fencing (2)
swisscoin (2)
regulation (2)
ru-interesting (2)
ru--titjki (2)
ru--piswki (2)
it (2)
advertising (2)
theory (2)
alcohol (2)
home (2)
duedill (2)
inchain (2)
locoso (2)
amd (2)
blockpay (2)
cosmetic (2)
sdc (2)
mobile (2)
shadowcash (2)
hi (2)
flag (2)
incent (2)
city (2)
fork (2)
cryptomania (2)
mass (2)
ios (2)
posts (2)
ru-art (2)
ru-library (2)
earnings (2)
japan (2)
price (2)
ru-book (2)
decor (2)
skoda (2)
senenskills (2)
craftbeerart (2)
blokcheyna (2)
hustlersmanual (2)
easy (2)
esoteric (2)
start (2)
steemit-ideas (2)
diet (2)
astronomy (2)
dpos (2)
trojan (2)
my (2)
internetecommerce (2)
research (2)
matrix (2)
style (2)
tour (2)
bees (2)
manual (2)
gadget (2)
visa (2)
dessert (2)
do (2)
avto (2)
rap (2)
ru-football (2)
ru-ru (2)
horror (2)
ru-poem (2)
card (2)
newcomers (2)
ru-tor (2)
lecture (2)
sciens (2)
museum (2)
bittrex (2)
forever (2)
support (2)
techreview (2)
pokemon-go (2)
psychedelic (2)
london (2)
summer (2)
fly (2)
iphone (2)
ru-stih (2)
computers (2)
riches (2)
taxes (2)
marketing (2)
p2p (2)
mobileapp (2)
cryptovallute (2)
daxi (2)
ship (2)
humour (2)
programming (2)
archive (2)
personal (2)
barbecue (2)
steemrussia (2)
want (2)
tattoo (2)
api (2)
joke (2)
review (2)
monero (2)
lotto (2)
doping (2)
legal (2)
com (2)
films (2)
feminism (2)
thevenusproject (2)
rusio (2)
fishing (2)
reviews (2)
to (2)
cityfrog (2)
liqui (2)
fsb (2)
steem-power (2)
soul (2)
transport (2)
gardering (2)
diary (2)
consciousness (2)
ukrainian (2)
sreemit-ru (2)
ru-traveling (2)
cia (2)
us (2)
view (2)
Bitcoin (2)
elections (2)
islam (2)
first (2)
quail (2)
altcoins (2)
dice (2)
roadmap (2)
bots (2)
robot (2)
writer (2)
extremism (2)
thw (2)
global (2)
crpcenter (2)
movies (2)
winter (2)
circus (2)
sheldrake (2)
tormozi (2)
optimism (2)
ocean (2)
no (2)
currency (2)
body (2)
hidden-gems (2)
trend (2)
go (2)
pay (2)
fitness (2)
wikipedia (2)
election (2)
product (2)
cyberpunk (2)
introduceyourself-ru (2)
nakladnoi (2)
gyroscooter (2)
friends (2)
steemithelp (2)
egaas (2)
bitkoin (2)
logo (2)
rome-antique (2)
roman-portrait (2)
potatoes (2)
cryptography (2)
zashita (2)
stuffed (2)
dolevik (2)
steemlotto (2)
vdice (2)
maining (2)
crimea (2)
crowdsale (2)
stomach (2)
kodovyi (2)
aliexpress (2)
liberland (2)
prof1983 (2)
steeme-ru (2)
fake (2)
pelevin (2)
system (2)
steemit-howto (2)
relationship (2)
service (2)
site (2)
create (2)
pc (2)
RuEenglish (2)
magic (2)
steemstats (2)
geforce (2)